1. 样品取材注意事项
“新鲜”:材料离体后1 min内进入固定液,避免细胞自溶和结构变化;
“体积适宜”:厚度<1 mm,长度宽度均<3 mm,固定液渗透能力有限,组织太大会导致无法固定充分,太小会在处理过程中漏出样品篮;
“机械损伤小”:动作轻巧,器械锋利,避免对组织的挤压和推拉;
“低温操作”:取材过程中的器械、容器、固定液均需预冷(降低酶活性,减少组织自溶)
“准确”:取材部位准确,且注意样本的方向性和定位。
①肠、血管、皮肤、肌肉等有方向性的样品需切成1 mm×3 mm的长方体小块,要观察的面为横切面,放入1.5 mL离心管并加满固定液;
②一般组织切成1 mm3大小,取3-5个组织,放入1.5 mL离心管并加满固定液;
③细胞样品:细胞量6 mm培养皿,细胞密度约90%;离心转速及时长:1000 rpm离心5分钟,最多不超过10分钟,将细胞收集到1.5 mL离心管中;弃掉培养基后应迅速沿管壁缓慢加入电镜固定液;收集的细胞团块体积约半颗绿豆大小,送样前需将细胞团块小心剥离离心管底,轻轻上下颠倒离心管确保细胞团块能在固定液中漂浮。